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企业管理系统开发费用 CHX联结MG132检测卵白质安定性的时势

发布日期:2024-09-26 15:57    点击次数:133

CHX是灰链霉菌的产品,常常用于检测卵白质或酶的半衰期。CHX约束细胞总卵白合成的旨趣是阻断真核细胞核糖体易位流程。用相宜浓度的CHX守护细胞(频繁为100μg/mL)不同期间点,网络细胞样品进行WB践诺检测卵白质丰采。

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半衰期短的卵白质会跟着期间的推移赶快降解,而半衰期长的卵白质跟着期间的推移,降解的很少。

CHX常用于检测卵白质的安定性和半衰期。鄙人面这个案例中,用50μg/mL的CHX守护6h和12h,WB检测卵白抒发,发现敲低AHI1加快了Tyk2的卵白质降解。

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敲低AHI1加快了Tyk2的卵白质降解(Ying Miao et al. 2023. bio protocol)

还不知说念检测卵白质安定性和半衰期时势的家东说念主不错先望望往期著述:《卵白质安定性、半衰期践诺的旨趣、时势和专揽》

MG132又称苄氧羰基-亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸,是一种多肽醛。MG132是公共熟知的卵白酶体约束剂,MG132的作用机制是通过与卵白酶体20S催化中枢的活性位点苏氨酸残基中的羟基半缩醛反馈,从而约束卵白酶体活性。

鄙人面这个案例中,使用MG132大概约束卵白质的泛素化降解,促进泛素化卵白的蕴蓄,从而更容易检测到卵白质的泛素化。如下图的图C所示:在不添加MG132时,即使Bmi-1和Ezh2能被泛素化,也可能会赶快降解,从而检测不到信号,MG132守护约束卵白酶体,企业管理系统开发费用导致泛素化的卵白蕴蓄,因此更容易检测到泛素化的卵白。

需要终点忽闪的是,如下图A和B所示,在不添加MG132时,可能检测不到ub信号。

需要泛素化质粒的不错相干小编。

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MG132促进卵白质泛素化(Sivaprakasam B et al. 2012. J Biol Chem)

另外,CHX和MG132也大概联结起来考据卵白质的安定性和降解道路。举例鄙人面这个案例中,左边是MG132和CHX荟萃守护,右边是只用CHX守护,w/o MG132暗示 without MG132。讲解MG132加多了a-SMN卵白的安定性,而MG132莫得加多FL-SMN的卵白安定性。

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MG132对a-SMN和FL-SMN卵白半衰期的影响(Denise Locatelli et al. 2015. PLOS ONE)

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公共不错字据我方的践诺标的活泼遴荐约束剂单独守护或荟萃守护,从而更故意于发现问题地点企业管理系统开发费用,更好的分析遵循。

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